Datorită tatălui ei, viitorul Carol al III-lea al Spaniei care obținuse tronul Regatului Neapole și al Siciliei în 1735, Maria Louisa s-a născut ca Maria Luisa a Neapolelui și Siciliei. Când tatăl ei a devenit rege la moartea unchiului ei vitreg, Ferdinand al VI-lea al Spaniei în 1759, ea a devenit Infanta Maria Luisa a Spaniei.
Maria Louisa s-a născut la Portici, în Campania, la palatul de vară al părinților ei, Carol, rege al Neapole și Sicilia și a Mariei Amalia de Saxonia. A fost a cincea fiică și al doilea copil supraviețuitor al părinților ei. Când tatăl ei a devenit rege al Spaniei, s-a mutat împreună cu toată familia în Spania.
La 16 februarie 1764 s-a căsătorit prin procură la Madrid cu Arhiducele Peter Leopold, al doilea fiu al lui Francisc I, Împărat al Sfântului Imperiu Roman și al împărătesei Maria Theresa a Austriei și moștenitorul Marelui Ducat de Tuscania. Anul următor, la 5 august, s-a căsătorit cu el în persoană, la Innsbruck. Câteva zile mai târziu, moartea împăratului Francisc l-a făcut pe soțul Mariei Luisa, nou Mare Duce de Tuscania iar noul cuplu s-a mutat la Florența unde vor trăi următorii 25 de ani.
Generațiile indică descendența de la Carol Quintul, sub care coroanele Castiliei și Aragonului s-au unit formând regatul Spaniei. Anterior, titlul de Infantă era folosit în diferite regate.
Prințesa Regina de Saxa-Meiningen •Prințesa Margherita de Savoia • Prințesa Anne Eugénie de Arenberg •Prințesa Yolande de Ligne • Contesa Xenia Czernicheva-Besobrasova • Prințesa Anna Gabriele de Wrede • Contesa Helena de Toerring-Jettenbach • Contesa Ludmilla de Gallen • Prințesa Laetitia de Arenberg** • Contesa Margaret Kálnoky von Köröspatak** • Maria Espinosa de los Monteros^^** • Contesa Valerie de Podstatzky-Lichtenstein** • Freiin Eva Antonia von Hdemann** • Prințesa Anna Amelie de Schönburg-Waldenburg** • Contesa Hedwig de Lichem-Löwenburg** • Freiin Edith von Sternbach** • Prințesa Margaret de Hohenberg • Contesa Marie Christine de Hatzfeldt-Dönhdef • Eugenia de Calonge^^ • Freiin Maria Theresia von Gudenus
Elisabetta Maria Rosboch von Wolkenstein*** • Estelle de Saint-Romain^^ • Kathleen Elizabeth Walker^^ • Adélaïde Drapé-Frisch^^ • Adélaïde Drapé-Frisch^^
*de asemenea infantă a Spaniei prin căsătorie **de asemenea Prințesă de Toscana prin căsătorie ***de asemeneaa Prințesă de Modena prin căsătorie ^de asemenea Arhiducesă de Austria prin drepturile ei ^^nu a deținut nici un titlu regal sau nobil prin naștere
